Результаты анализа крови расшифровка у взрослых на вич

Результаты анализа крови расшифровка у взрослых на вич

Цитомегаловирус IgM обнаруживаются через 30-45 дней после заражения, либо во время реактивации инфекции в течение 4-6 месяцев

источник

При выявлении заболевания ВИЧ у человека проводят несколько последовательных диагностик, имеющих разный алгоритм действия. Метод, применяемый в самом начале диагностики – ИФА на ВИЧ. Это иммуноферментный анализ, с помощью которого в организме обнаруживается ответная реакция на вирус.

В первые четыре недели количество вируса в организме недостаточно, чтобы возник ответ. Поэтому, для получения достоверного результата первый ВИЧ анализ необходимо делать на шестой неделе после возможного заражения.

ИФА проводится тремя методами: прямой анализ крови, косвенный и метод «сэндвича». Вероятность такого определения СПИДа около 97%. Если в образце крови обнаруживается ответный белок на вирус иммунодефицита человека, значит заболевание есть. Данный метод позволяет увидеть разновидность вируса, благодаря чему можно подобрать более эффективное лечение и сохранить здоровье человека.

С развитием науки методы анализа продолжают совершенствоваться. Крови требуется все меньше, а результат все точнее. В настоящее время используется анализ ИФА 4 поколения на ВИЧ. Достоверность такого метода значительно выше предыдущих вариантов.

Тест на ВИЧ 4 поколения позволяет дифференцировать ответные белки на группы и определять специфику вируса.

Кроме ИФА применяется еще несколько вариантов тестирования:

  • Качественный ПЦР;
  • Количественный ПЦР;
  • Иммуноблоттинг;

Однозначно сказать, что лучше ПЦР или ИФА нельзя, так как разные методы эффективны в разные периоды активности вируса. Для достоверного вердикта, как правило, проводятся все варианты тестов.

Важно! Если частные клиники предлагают провести дорогой, но очень точный анализ на ВИЧ пятого или шестого поколения, не стоит этому верить. В настоящее время разработан и активно используется только ИФА 4-го поколения. Анализ лучше проводить в государственном учреждении, имеющем лицензию.

Часто при обследовании у ВИЧ-положительных людей обнаруживают сопутствующие заболевания: хламидию цитомегаловирус, сифилис, трихомониаз и т.д. эти организмы могут способствовать неправильной диагностике, поэтому после лечения тест на ВИЧ повторяют.

В цикле развития вируса можно выделить несколько стадий:

  • Инкубационный период;
  • Период острой инфекции;
  • Латентный период;
  • Стадия вторичных заболеваний.

На первом этапе ответная реакция не возникает, либо ее интенсивность настолько мала, что индикаторы ее не фиксируют. В это время проводить анализ нецелесообразно.

Второй период начинается примерно через 6 недель после заражения. Именно в этот срок проводят первичное обследование.

При проведении анализа важно учитывать индивидуальные особенности организма. Поэтому для получения достоверных результатов тест повторяют через 12 недель (через 3 месяца) и через 6 месяцев.

Если во все или часть указанных периодов анализ оказался положительных, назначают другой анализ на ВИЧ (иммуноблоттинг). Он должен показать степень развития заболевания и специфику его течения.

Важно! Если через несколько недель или месяцев анализ на ВИЧ оказался отрицательным, это не значит, что вируса больше нет. Анализ мог совпасть с периодом окна. В этом случае нельзя прекращать лечение и контроль за развитием заболевания.

Несмотря на высокую точность используемых методов, анализ может оказаться ошибочным из-за:

  • Плохой дезинфекции медицинского инструмента;
  • Ошибок персонала лаборатории;
  • Неправильной подготовки пациента к сдаче крови;
  • Неточная калибровка прибора и др.

Для правильного анализа важен правильно подобранный срок исследования.

Приборы, работающие с кровью, чувствительны в различным сопутствующим компонентам. Определенные вещества в крови могут привести к сбою аппаратуры и неправильному результату. Поэтому перед тем как делать анализ на ВИЧ, необходимо подготовиться.

При проведении ИФА человек должен соблюдать все правила подготовки к обычной сдаче крови:

  • Перед анализом не есть жирную, сладкую пищу;
  • Не курить за 12 часов до теста;
  • Не перегружать организм физическими нагрузками;
  • Если работа предполагает химические факторы риска, стоит взять отгул;
  • Не употреблять лекарственные препараты за два дня до анализа.

В нашей стране практически все медицинские учреждения оснащены лабораторным оборудованием для анализа ВИЧ. Для того, чтобы проверить свой статус достаточно обратиться к терапевту и взять направление на обследование.

Существует программа всероссийской проверки на ВИЧ, когда диагностика ЗППП проводится в мобильных лабораториях. Чтобы провериться в них, достаточно иметь паспорт и желание.

Если человек стесняется обращаться в больницу, тест можно провести дома, но точность таких приборов очень низкая.

При проведении анализа порцию крови помещают в специальный аппарат и обрабатывают иммуноферментными препаратами. Это должно способствовать выделению белков р15, р17, р24, р31. Через определенное время помещают сыворотку в прибор, фиксирующий наличие иммунных клеток.

Сдача анализа на ВИЧ проводится строго натощак.

При ИФА обнаруживают не антигены вируса, а наличие антител к вирусу. Этот метод является более точным, потому что в первом случае может пройти реакция с иными вирусами в организме.

После анализа крови на ВИЧ может получиться несколько вариантов результатов:

  • Положительный;
  • Отрицательный;
  • Ложноположительный;
  • Ложноотрицательный;
  • Сомнительный.

Если иммуноферментный тест на ВИЧ положительный, значит у человека есть заболевание. Все остальные значения результатов исследования означают, что анализ необходимо повторить или переделать, так как результат неточный.

Точность иммунодефицитного результата зависит от:

  • Правильности калибровки прибора;
  • Правильной дезинфекции оборудования;
  • Подготовки пациента к анализу;
  • Соответствии действий персонала технике проведения анализа.

При слабом иммунном ответе результат выдается сомнительный. Это значит, что вирус есть, но его количество слишком мало, что может быть следствием плохой очистки прибора от предыдущего исследования. В этом случае тест проводится повторно.

Важно! Только метод ИФА может показать причину смерти от ВИЧ, так как белок еще находится в организме. Сам вирус быстро погибает при гибели носителя, поэтому другие методы диагностики не работают.

Когда человек получает положительный анализ ИФА на ВИЧ, необходимо сразу обратиться к лечащему врачу. Поставить окончательный вердикт о наличии или отсутствии ВИЧ инфекции может только врач специалист на основании точного исследования. Во всех случаях, когда ИФА положительный, назначают повторный анализ ПЦР на определение количества вируса. По комплексу данных врач делает вывод о скорости течения заболевания и особенностях развития вируса.

Совет! Нельзя забрасывать дальнейшее обследование при первом положительном результате. Иногда такой результат дает неправильная подготовка и проведение теста.

Результаты ИФА считаются достоверными только после повторного проведения анализа и подтверждении результата.

При получении положительного теста необходимо проконсультироваться в врачом. Если из ряда тестов положительным оказался только один, анализ стоит повторить через несколько недель для получения достоверных данных.

Причиной ошибочного результата могут быть следы крови от предыдущего анализа.

Многие заболевания могут способствовать получению недостоверных данных:

  • Заболевания щитовидной железы;
  • Хронические простудные заболевания;
  • Наличие паразитов.

Такие отклонения в здоровье не позволяют обнаружить вирусный след методом ИФА. Пациентам назначаются другие виды диагностики.

Не стоит забывать, что срок сдачи анализа может попасть на время серонегативного окна, когда активность вируса снижена и он не определяется. Для того чтобы получить достоверный результат, необходимо провести повторный анализ через несколько недель.

Для анализа нельзя приносить кровь с собой, так как белок, который выявляют при ИФА быстро денатурирует, что поспособствует получению отрицательного результата.

Один из способов обнаружения клеток вируса в период окна это ПЦР. Перед этим анализом проводится полимеразно-цепная реакция, увеличивающая количество РНК-отрезков, что позволит сделать препарат более доступным для анализа.

Чтобы избежать вертикальное заражение плода от инфицированной матери, всем женщинам во время беременности назначается ИФА-анализ на ВИЧ. Кровь берется в начале беременности вместе с другими анализами. В некоторых случаях, при сомнительном результате, или если женщина находится в постоянном контакте с ВИЧ-положительным партнером, наблюдение ведется в течении всей беременности.

Если с помощью тестов у женщины выявляется ВИЧ, в лаборатории проводится повторный анализ.

При достоверном положительном результате женщине назначается легкая антиретровирусная терапия с целью предотвращения возможного заражения плода.

Важно! Если во время беременности выявляется ВИЧ у женщины, это не значит, что ребенок будет гарантировано ВИЧ-положительным. При своевременном обращении к врачу, грамотном применении препаратом и постоянном наблюдении ребенок родится здоровым. Здоровье ребенка во многом зависит от грамотного поведения мамы!

Человеку с ВИЧ-положительным статусом нельзя заниматься самолечением. Это заболевание всегда индивидуально и зависит от способа заражения, активности вируса, иммунной системы человека и множества других факторов. Лечение зависит от протекания ВИЧ. Только врач может назначить грамотное лечение.

Течение заболевания и степень отклика на медицинские препараты проверяется при проведении повторных анализов. Такие анализы важно сдавать, так как в силу индивидуальных особенностей, лечение может оказаться неэффективным, что поспособствует развитию болезни и ухудшению самочувствия пациента.

источник

ВИЧ-инфекция — заболевание, вызываемое вирусом иммунодефицита человека (ВИЧ), длительное время персистирующим в лимфоцитах, макрофагах, клетках нервной ткани, в результате чего развивается медленно прогрессирующее поражение иммунной и нервной систем организма, проявляющееся вторичными инфекциями, опухолями, подострым энцефалитом и другими патологическими изменениями. Возбудители — вирусы иммунодефицита человека 1-го и 2-го типов — ВИЧ-1, ВИЧ-2, (HIV-I, HIV-2, Human Immunodeficiency Virus, types I, II) — относятся к семейству ретровирусов, подсемейству медленных вирусов. Вирусная частица имеет сферическую форму диаметром 100−140 нм с наружной фосфолипидной оболочкой, включающую гликопротеины (структурные белки) с определенной молекулярной массой, измеряемой в килодальтонах. У ВИЧ-1 это gp 160, gp 120, gp 41. Внутренняя оболочка вируса, покрывающая ядро, также представлена белками с известной молекулярной массой — р17, р24, р55 (ВИЧ-2 содержит gp 140, gp 105, gp 36, р16, р25, р55). Выявление антител (АТ) к вирусу иммунодефицита человека — основной метод лабораторной диагностики ВИЧ-инфекции. В основе метода лежит ИФА (чувствительность — более 99,5%, специфичность — более 99,8%). Также для диагностики ВИЧ-инфекции применяется определение антигена (Аг) p24 методом ИФА.

Для достоверной оценки результата обследования на ВИЧ следует помнить, что она зависит от времени, прошедшего от момента потенциального заражения:

  1. тест на ВИЧ-инфекцию, выполненный непосредственно после потенциального заражения, не информативен, так как антитела к ВИЧ еще не образовались. По этой причине выполнение теста целесообразно не ранее 3-й недели после потенциального контакта с вирусом. Исключение составляют юридические основания (например, у медицинских работников при травме иглой, содержащей биологический материал), когда необходимо удостовериться, что на момент контакта с потенциальным носителем ВИЧ-инфекции она у данного пациента отсутствовала;
  2. с достаточной точностью ВИЧ-инфекцию можно исключить только через 3 месяца после потенциального заражения. Поэтому после контакта с носителем инфекции обязательно выполнение контрольного обследования. Тем не менее, повторное выполнение анализа через 3 месяца (т.е. через 6 месяцев после потенциального заражения) имеет смысл только в исключительных случаях, к примеру, при наличии клинического подозрения на острый ретровирусный синдром;
  3. отрицательный результат теста является надежным только в том случае, если в течение прошедших трех месяцев отсутствовал повторный контакт с вирусом.

При наличии клинического подозрения на острую ВИЧ-инфекцию (острый ретровирусный синдром, контакт группы риска с ВИЧ-инфицированным человеком) целесообразно выполнение ВИЧ-ПЦР. С учетом возможного ложноотрицательного результата, в общих случаях ВИЧ-ПЦР может использоваться для исключения факта передачи ВИЧ-инфекции, однако лишь условно — она не может заменить серологический анализа на ВИЧ. Поэтому метод ВИЧ-ПЦР должен применяться только в дополнение к серологическому анализу, но не вместо него. Метод ВИЧ-ПЦР, используемый в рутинной клинической практике, позволяет определять исключительно ВИЧ-1.

В ряде случаев проводят экспресс-тесты на ВИЧ-инфекцию. Эти тесты дают быстрый результат и просты в использовании, для их выполнения и оценки результатов не требуется применение специальных приборов, поэтому экспресс-тесты могут применяться непосредственно на месте оказания помощи. В качестве материала для исследования, наряду с плазмой и сывороткой крови, может использоваться также цельная или капиллярная кровь (из пальца или мочки уха), которая не требует центрифугирования. Некоторые тест-системы позволяют использовать мочу или транссудат слизистой оболочки ротовой полости. Тест показывает результат уже через 15-30 минут. Экспресс-тесты особенно подходят для ситуаций, когда результат теста влечет за собой непосредственные последствия. К примеру, это относится к таким ситуациям, как экстренные операции или травма иглой, содержащей биологический материал. При использовании данного теста существуют ограничения, касающиеся диагностики ВИЧ-инфекции до сероконверсии, поскольку почти все имеющиеся экспресс-тесты позволяют определять только антитела к ВИЧ, но не антиген p24. Экспресс-тесты должны использоваться только для первичной ориентировочной оценки. Они не подходят для подтверждения или исключения острой инфекции. Результат экспресс-теста должен быть подтвержден при первой же возможности в ходе рутинного лабораторного исследования с использованием стандартного анализа на ВИЧ.

  • при наличии клинического подозрения на ВИЧ-инфекцию после личного или профессионального контакта с больным;
  • при госпитализации в стационар;
  • перед хирургической операцией;
  • донорам крови и органов;
  • при планировании и вынашивании беременности;
  • при обследовании на инфекции, передающиеся половым путем;
  • при вероятном заражении (переливание инфицированной крови, близком контакте с ВИЧ-инфицированным, после случайного незащищенного секса);
  • для выяснения инфекционного статуса полового партнера пациента;
  • медицинским работникам при травме иглой, содержащей биологический материал;
  • при длительном субфебрилитете;
  • при частых повторных инфекционных заболеваниях.

Главное условие для сдачи анализа — отказ от еды минимум за 8 часов до процедуры, а также запрет на алкоголь.

Забор крови осуществляется амбулаторно по стандартной технологии — из вены стерильным шприцем. Для исследования достаточно 5 мл.

В случае инфицирования ВИЧ продукция антител начинается не ранее чем через две недели.

Антиген p24 может определяться приблизительно за 5 дней до первичного появления специфических антител. Аг р24 — белок стенки нуклеотида ВИЧ. Стадия первичных проявлений после инфицирования ВИЧ — следствие начала репликативного процесса.

Через 4 недели после заражения ВИЧ-специфические антитела определяются в 60-65 % случаев, через 6 недель — в 80 % случаев, через 8 недель — в 90 % случаев, через 12 недель — в 95 % случаев. В стадии СПИДа количество АТ может снижаться вплоть до полного исчезновения. При получении положительного ответа (выявлении АТ к ВИЧ) во избежание ложноположительных результатов анализ необходимо повторить еще один или два раза, желательно с использованием диагностикума другой серии. Результат считают положительным, если из двух — в обоих анализах или из трех — в двух анализах отчетливо выявлены АТ.

Аг р24 появляется в крови через 2 недели после инфицирования и может быть выявлен методом ИФА в период от 2 до 8 недель. Через 2 месяца от начала инфицирования Аг р24 исчезает из крови. В дальнейшем в клиническом течении ВИЧ-инфекции отмечают второй подъем содержания в крови белка р24. Он приходится на период формирования СПИД. Существующие тест-системы ИФА для детекции Аг р24 используют для раннего обнаружения ВИЧ у доноров крови и детей, определения прогноза течения заболевания и контроля за проводимой терапией. Метод ИФА обладает высокой аналитической чувствительностью, что позволяет обнаруживать Аг р24 ВИЧ-1 в сыворотке крови в концентрациях 5−10 пкг/мл и менее 0,5 нг/мл ВИЧ-2, и специфичностью. Вместе с тем следует отметить, что содержание Аг р24 в крови подвержено индивидуальным вариациям, что позволяет выявить только 20−30% пациентов с помощью этого исследования в ранний период после инфицирования.

АТ к Аг р24 классов IgM и IgG в крови появляются, начиная со 2-й недели, достигают пика в течение 2−4 нед и держатся на таком уровне различное время — АТ класса IgM в течение нескольких месяцев, исчезая в течение года после инфицирования, а АТ IgG могут сохраняться годами.

АТ к ВИЧ 1/2 в сыворотке крови в норме отсутствуют.
Антиген р24 в сыворотке в норме отсутствует.

В стадии СПИДа количество АТ может снижаться вплоть до полного исчезновения. На период формирования СПИД отмечается подъем содержания в крови белка р24.

  • facebook
  • twitter
  • odnoklassniki
  • vkontakte
  • youtube
  • mail
  • Online диагноз
    © ООО «Интеллектуальные медицинские системы», 2012—2019 гг.
    Все права защищены. Информация сайта юридически защищена, копирование преследуется по закону.

    Размещение рекламы, сотрудничество: info@online-diagnos.ru

    Сайт не несет ответственность за содержание и достоверность размещенного пользователями на сайте контента, отзывы посетителей сайта. Материалы сайта носят исключительно информационно-ознакомительный характер. Содержание сайта не является заменой профессиональной консультации врача-специалиста, диагностики и/или лечения. Самолечение может быть опасно для здоровья!

    источник

    Особое внимание в настоящее время уделяется диагностированию ВИЧ (вируса иммунодефицита) у человека. Обнаружение болезни на ранней стадии поможет раньше начать лечебный курс и это существенно скажется на увеличении срока жизни больного.

    После того, как будет сдан анализ на ВИЧ расшифровка результатов, как правило, бывает положительной, или отрицательной. При этом существует первичная диагностика и вторичная. При первичной — человека проверяют с помощью ИФА. Если это необходимо, делается повторный анализ крови на ВИЧ. Что значит положительный и отрицательный результат? Как делается расшифровка анализа на ВИЧ? Почему у человека, который не является наркоманом и алкоголиком, имеет постоянного полового партнера, расшифровка анализа на вирус иммунодефицита дает положительный, но сомнительный результат?

    Возбудители заболевания бывают 1-ого и 2-ого типа. Продолжительный промежуток времени их присутствие у человека проходит незамеченным, дальше поражается в первую очередь иммунитет, затем другие системы человека.

    При основном методе лабораторного диагностирования вируса иммунодефицита выявляются антитела к ВИЧ. Иммуноферментный анализ (ИФА) лежит в основе метода, он чувствителен (99,5% и выше) и специфичен (99,8% и выше). Кроме этого, при диагностировании ВИЧ с помощью ИФА определяют антиген р24.

    Каждая тест-система имеет различные показатели, в связи с этим ими происходит определение различных белковых структур вирусных оболочек. Возбудители ВИЧ бывают двух подтипов: 1-ого и 2-ого или ВИЧ-1 и ВИЧ-2. Вирусные частицы выглядят как сферическая форма, имеющая наружную фосфолипидную оболочку. Для 1-ого подтипа она имеет следующую молекулярную массу: gp120, gp41, gp160. 2-ой подтип содержит gp105, gp36, gp140. Для внутренней оболочки вируса молекулярная масса так же известна. Для 1-ого подтипа это — p55, p17, p24. Для 2-ого — p16, p25, p55.

    Для каждой тест-системы, чтобы определить вирус, существует три основных набора белков.

    Вообще результат ИФА может быть:

    • отрицательный;
    • ложноположительный;
    • ложноотрицательный;
    • сомнительный или неопределенный.

    Методами диагностирования выявляются антигены, антитела.

    Норма — что это значит? Когда анализ на ВИЧ отрицательный, это считается нормой.

    1. Последнее поколение тест-систем ИФА позволяют определить наличие антител к ВИЧ и белковых частиц. Если анализ в норме, то в крови не находят антител и белковых частиц возбудителя. Но точно сказать, что человек здоров на основе этого можно, если до сдачи его отсутствовал риск заражения 3 месяца. В противном случае еще раз через какое-то время надо повторить сдачу анализов.

    Бывали случаи, что ВИЧ обнаруживали только через 6 месяцев. Поэтому, если результат отрицателен, а был контакт с ВИЧ-инфицированным больным, для достоверности надо повторить сдачу анализов через три, четыре и шесть месяцев. Бывает, что ИФА дал отрицательный результат, а у человека явно есть подозрение на присутствие признаков ВИЧ, то рекомендуется сдать анализ еще раз. Ошибочный результат возможен из-за ранних сроков проведения анализа либо из-за человеческого фактора.

    2. Если результат отрицательный получен при иммуноблоте, то в настоящее время это самый достоверный анализ.

    Если у человека присутствует вирус иммунодефицита, а результат отрицательный, то скорее всего это врачебная ошибка, которая может возникнуть на любом этапе проверки. Если при повторе иммуноблота через три и шесть месяцев результат отрицательный, то беспокоиться не о чем, это говорит о норме. И только после отрицательного ответа иммуноблота будет выдана справка, что ВИЧ анализ отрицательный.

    3. ПЦР исследование у взрослых при диагностировании вируса иммунодефицита используется крайне редко, а для только что рожденных детей используется именно этот метод.

    Нормой здесь так же считается отрицательный результат.

    4. Согласно социологическим исследованиям, многие пользуются экспресс-тестом на ВИЧ. При виде отрицательной полоски люди успокаиваются и отказываются идти в медицинское учреждение, даже при наличии всех признаков ВИЧ-инфицирования. Но надо знать, что точность экспресс-теста составляет восемьдесят пять процентов. Кроме этого, в домашних условиях можно неверно его провести, или будут нарушены условия его хранения. Возникает еще большая вероятность, что результат неверен. Даже прием за 8 часов до тестирования минеральной щелочной воды повлияет на результат теста. Поэтому о том, что вирус иммунодефицита отсутствует у человека на основании экспресс-теста, даже если он отрицательный, далеко не всегда является верным утверждением.

    После того, как было проведено тестирование у людей часто возникает вопрос, как расшифровать результат исследований, что делать, если получен положительный результат на ВИЧ.

    1. Если ИФА показал наличие всех или почти всех антител к антигенам согласно данной тест-системы, это обозначает положительный анализ на ВИЧ. Если ответ после проведения второго серологического иммуноферментного анализа положительный, то необходимо провести иммуноблот. Расшифровка результатов его будет более верной. Если иммуноферментный анализ дал положительный результат, следующий анализ иммуноблота так же показал наличие ВИЧ, то ставится заключительный результат. Когда расшифровываются анализы, то надо знать, что положительный тест на ВИЧ определяется:

    • от 60% до 65% через 28 дней после заражения;
    • в 80% — через 42 дня;
    • в 90% — через 56 дней;
    • в 95% — через 84 дня.

    Если получен ответ на ВИЧ положительный, то это будет означать, что выявлены антитела к вирусу. Чтобы избежать ложноположительный ответ, надо сдать повторно анализы, желательно два раза. Если антитела к иммунодефициту выявлены при сдаче двух анализов из двух либо при сдаче 3-х анализов в 2-х из них, то считается, что результат положительный.

    Антиген р 24 можно выявить в крови уже через 14 дней со дня заражения. С помощью метода иммуноферментного анализа этот антиген выявляется от 14 до 56 дней. По прошествии 60 дней его в крови уже нет. Только когда в организме формируется СПИД, происходит повторно рост этого белка р24 в крови. Поэтому тест-системы иммуноферментного анализа используются, чтобы обнаружить ВИЧ в первые дни заражения либо для того, чтобы определить, как протекает заболевание и контролировать процесс лечения. Высокая аналитическая чувствительность иммуноферментного анализа обнаруживает антиген р24 в биологическом материале при ВИЧ первого подтипа в концентрации от 5 до 10 пкг/мл, при ВИЧ второго подтипа от 0,5 нг/мл и меньше.

    2. Под сомнительным результатом иммуноферментного анализа подразумевается, что при диагностировании где-то ошиблись, как правило, что-то перепутали медицинские работники, или у человека есть признаки инфицирования, а результат отрицательный, что вызывает подозрение, человека направляют на повторную сдачу анализа.

    3. Под ложноположительным результатом понимается результат, когда сдача анализов крови была сделана при следующих состояниях больного:

    • беременность;
    • если у человека нарушен гормональный фон;
    • при продолжительной иммунодепрессии.

    Как расшифровать анализ в этом случае? Ложноположительный результат ставится, если выявляется хотя бы один белок.

    Из-за того, что антиген р24 очень зависит от индивидуальных вариаций, то, используя этот метод, в первый период заражения выявляется от 20% до 30% больных.

    Используя этот метод РНК ВИЧ и ДНК обнаруживается почти сразу после заражения. Но окончательного диагноза не ставится, требуется обязательное подтверждение другими методами. «Помогите расшифровать результат ПЦР.» — довольно часто можно услышать такую просьбу. Что пишется в этом случае, если обнаруживается вирус иммунодефицита? При ответе на результат анализа, сделанного с помощью ПЦР указывается количество копий РНК в миллилитре крови. В таблице, приведенной ниже, показан результат в зависимости от количественных характеристик в крови.

    Количественный показатель
    (кол-во копий)
    Меньше 20 От 20 до 10 6 Больше 10 6
    Для постановки диагноза концентрации РНК недостаточно (неточный) Достоверный Вирусная нагрузка большая

    Использовать вышеприведенную таблицу хорошо, когда делается обследование на СПИД, так как по ней легко определяется стадия болезни.

    Эти таблицы с учетом различных тест-систем есть в лабораторных кабинетах для каждого метода иммуноферментного анализа и иммуноблоттинга.

    Часто просят: «Расшифруйте ответ после исследования методом полимеразной цепной реакции по показателю СД4.» Нормальным считается количество клеток СД4 от 600 до 1900 клеток на миллилитр биологического материала. Это соответствует ВИЧ-отрицательному статусу. Но надо знать, что эти показатели даже у здоровых людей бывают не в этом диапазоне.

    В современном мире уже много лабораторий имеют хорошее оборудование, с помощью которого можно полностью исследовать организм на содержание в нем ВИЧ-инфекции.

    источник

    ИФА (иммуноферментный анализ, ELISA – англ.) вошел в жизнь практической медицины еще где-то в 60-х прошлого столетия. Первоначальной его задачей были гистологические исследования в научных целях, которые сводились к поиску и идентификации антигенной структуры клеток живого организма.

    В основе метода ИФА лежит взаимодействие специфических антител (АТ) и родственных антигенов (АГ) с образованием комплекса «антиген – антитело», который выявляют при помощи фермента. Этот факт натолкнул ученых на мысль, что метод может быть использован в диагностических целях для выявления специфических иммуноглобулинов различных классов, участвующих в иммунном ответе на ту или иную инфекцию. И это был прорыв в клинической лабораторной диагностике!

    Активно использоваться метод начал только в начале 80-х и то, в основном, в специализированных учреждениях. Первыми иммуноферментными анализаторами были снабжены центры и станции переливания крови, инфекционные и венерологические стационары, поскольку рожденный на африканском континенте, появившийся на горизонте у нас и тут же примкнувший к «старым» инфекциям грозный СПИД, требовал незамедлительных мер диагностики и поиска лечебных препаратов, воздействующих на него.

    Возможности иммуноферментного анализа поистине обширны. Теперь и представить себе трудно, как можно обойтись без подобных исследований, применяемых буквально во всех отраслях медицины. Кажется, что может сделать ИФА в онкологии? Оказывается, может. И многое. Способность анализа находить маркеры, свойственные некоторым видам злокачественных новообразований, лежит в основе раннего выявления опухоли, когда другим способом она еще не определяется из-за своих небольших размеров.

    Современная клиническая лабораторная диагностика (КДЛ), кроме онкомаркеров, располагает значительным арсеналом панелей для ИФА и использует их для диагностики различных патологических состояний (инфекционных процессов, гормональных нарушений) и мониторинга фармацевтических лечебных препаратов с целью выявления их влияния на организм больного и, кстати, не только человека. В настоящее время иммуноферментный анализ широко используется и в ветеринарной службе, ведь «братья наши меньшие» тоже подвержены многим заболеваниям, от которых, порой, очень сильно страдают.

    Таким образом, ИФА, благодаря своей чувствительности и специфичности, по образцу крови, взятому из вены, может определить:

    • Гормональный статус (гормоны щитовидной железы и надпочечников, половые гормоны);
    • Присутствие вирусной и бактериальной инфекции (ВИЧ, гепатиты В и С, хламидиоз, сифилис, уреа- и микоплазмоз, герпетическая и TORCH-инфекции, а также многие другие болезни, вызванные патогенными микроорганизмами);
    • Следы жизнедеятельности микроорганизмов, возбудивших инфекционный процесс, который благополучно закончился и перешел в стадию формирования иммунного ответа на этот возбудитель. Такие следы, то есть, антитела, во многих случаях остаются циркулировать в крови пожизненно, чем защищают человека от повторного заражения.

    Иммуноферментный метод, позволяет определить не только присутствие самого возбудителя (качественный анализ), но и его количественное содержание в сыворотке крови больного.

    Вирусовая или бактериальная доза существенно влияет на течение инфекционного процесса и его исход, поэтому количественному анализу отведена не последняя роль в диагностике и лечении заболеваний в различных формах и стадиях.

    Однако зная иммуноферментные исследования, как метод ИФА, мы даже не задумываемся, как же ему удается охватить такой широкий круг микроорганизмов, населяющих нашу планету, многие из которых несут прямую угрозу здоровью и жизни человека и животных. А дело в том, что ИФА имеет много вариантов (неконкурентный и конкурентный – прямой и непрямой), каждый из которых решает свою задачу и, таким образом, позволяет проводить целенаправленный поиск.

    Для выявления иммуноглобулинов того или иного класса используется традиционная 96-луночная полистироловая панель (планшет), в лунках которой в твердой фазе сосредоточены сорбированные рекомбинантные белки. Попавшие в лунку с сывороткой крови антитела или антигены, находят «знакомый» объект и образуют с ним комплекс (АГ – АТ), который, закрепившись ферментным конъюгатом, при считывании результатов проявится изменением окраски лунки.

    Иммуноферментный анализ проводится на тест-системах определенной специфичности, изготовленных в специальных лабораториях и укомплектованными всеми необходимыми реагирующими компонентами. Исследования можно проводить с помощью промывных аппаратов («вошеров») и считывающих спектрофотометров, где большей частью задействован ручной труд. На полных автоматах, освобождающих лаборанта от монотонного закапывания, промывания и прочих рутинных дел, конечно, работать быстрее и удобнее, но не все лаборатории могут позволить себе такую роскошь и продолжают работать по старинке – на полуавтоматах.

    Интерпретация результатов ИФА находится в компетенции врача лабораторной диагностики, при этом обязательно берется в расчет и присущее практически всем иммунохимическим реакциям свойство давать ложноположительные или ложноотрицательные ответы.

    Иммуноферментный анализ подходит для выявления всех форм сифилиса, а, кроме этого, применяется в проведении скрининговых исследований. Для проведения анализа используют венозную кровь пациента, взятую натощак. В работе используются планшеты с определенной специфичностью (АТ классов А, М, G) или суммарные антитела.

    Учитывая то, что АТ при сифилисе продуцируются в конкретной последовательности, ИФА может легко ответить на вопрос, когда произошло заражение и в какой стадии находится процесс, а расшифровка полученных результатов может быть представлена в следующем виде:

    • IgM указывают на продолжительность инфекционного процесса (могут появляться при обострении хронических воспалительных заболеваний);
    • IgA констатируют, что заражение случилось более месяца назад;
    • IgG свидетельствуют о том, что инфекция находится в самом разгаре или о проведенном недавно лечении, что легко выясняется при сборе анамнеза.

    При проведении анализа на сифилис, лунки с отрицательным ответом (и отрицательный контроль) останутся бесцветными, в то время как положительный результат (как и положительный контроль) даст ярко-желтое окрашивание за счет изменения цвета хромогена, добавленного в ходе исследования. Однако интенсивность окраски не всегда совпадает с контролем, то есть, она может быть немного бледнее или слегка желтоватой. Это сомнительные результаты, которые, как правило, подлежат повторному исследованию с обязательным учетом количественных показателей, полученных на спектрофотометре, но в целом, окраска находится в прямо пропорциональной зависимости от количества иммунных комплексов (связанные между собой АГ и АТ).

    Анализ на ВИЧ, пожалуй, больше других интересен широкому кругу населения, ведь пока нельзя с уверенностью утверждать, что исчезли многие социальные проблемы (проституция, наркомания и др.). К сожалению, ВИЧ затрагивает не только эти слои человеческого общества, заразиться можно при различных обстоятельствах, не связанных с половой распущенностью или приемом наркотиков. Но коль возникла необходимость обследования на ВИЧ, то бояться не следует, что все вокруг узнают о посещении такой лаборатории. Сейчас ВИЧ-инфицированные люди защищены законом, а сомневающиеся могут обратиться в анонимные кабинеты, где можно решить проблему, не боясь огласки и осуждения.

    Иммуноферментный метод, применяемый для диагностики ВИЧ инфекции, относится к первостепенным стандартным исследованиям, которые, однако, требуют особых условий, поскольку тема очень деликатная.

    ИФА на ВИЧ имеет смысл проводить после полового контакта, переливания крови, других медицинских манипуляций, предполагающих заражение, и по окончании инкубационного периода («серонегативное окно»), но следует учитывать, что этот промежуток времени не является постоянным. Он может закончиться через 14-30 дней, а может продолжаться до полугода, поэтому средним значением принято считать интервал от 45 до 90 дней. На ВИЧ кровь сдают так же, как и на другие инфекции – из вены на голодный желудок. Результаты будут готовы в зависимости от накопления материала в лаборатории и ее загруженности (от 2 до 10 дней), хотя чаще всего лаборатории обеспечивают получение ответа в тот же день или на следующий.

    ИФА на ВИЧ-инфекцию определяет антитела к двум разновидностям вируса: ВИЧ-1 (более распространенный в России и других странах Европы и Азии) и ВИЧ-2 (встречающийся чаще на территории Западной Африки).

    Задачей ИФА ВИЧ является поиск АТ класса G, которые выявляются на всех тест-системах, но в более позднем периоде, и АТ классов А и М, выявляемых на рекомбинантных тест-наборах нового поколения, позволяющих найти антитела на самых ранних стадиях (инкубационный период – «серонегативное окно»). От ИФА можно ожидать следующие варианты ответов:

    1. Первичный положительный результат: кровь подлежит перепроверке на тест-системе такого же типа, но по возможности другой серии и другим человеком (лаборантом);
    2. Повторный (+) предполагает новый забор крови у пациента с исследованием ее подобно первичному анализу;
    3. Очередной положительный результат подлежит референтному анализу, при котором используются высокоспецифичные тест-наборы (2-3 шт.);
    4. Положительный результат в обеих (или в трех) системах направляется на иммуноблотинг (тот же ИФА, но выполненный в индивидуальном порядке на тест наборах особо высокой специфичности).

    Заключение о ВИЧ инфицировании выносится только на основании иммуноблотинга. Проводится беседа с инфицированным в условиях полной конфиденциальности. Разглашение медицинской тайны в России, как, впрочем, и в других странах, подлежит уголовному наказанию.

    Анализы на хламидии и цитомегаловирус иммуноферментным методом также обрели особую популярность, ввиду того, что позволяют определить время заражения, стадию заболевания и эффективность лечебных мероприятий.

    При внедрении хламидии тоже можно наблюдать появление антител различных классов в разных фазах патологического состояния, вызванного инфекционным агентом:

    • IgM могут обнаружиться уже дней через семь после заражения;
    • IgA говорят о том, что инфекция в организме живет уже более месяца;
    • IgG подтверждают диагноз хламидиоза, помогает следить за лечением и определить его действенность. Следует заметить, что антитела класса G остаются и циркулируют в организме независимо от давности болезни, поэтому для правильной расшифровки анализа нужно принимать во внимание референтные значения (нормы), которые, кстати, для каждой КДЛ свои: с учетом марки тест-системы и специфичности реагентов, входящих в набор. Значения нормы вписываются в бланк рядом с результатом ИФА.

    Что касается цитомегаловируса (ЦМВ), то здесь несколько иначе: антитела класса М появляются приблизительно через месяц-полтора, то есть, положительным результат (IgM+) становится в фазе первичного инфицирования или при реактивации скрытой инфекции и остается таковым от 4 месяцев до полугода.

    Наличие АТ класса G характерно для начала первичной острой инфекции или реинфекции. Анализ констатирует, что вирус имеет место, однако информации, в какой стадии находится инфекционный процесс – не дает. Между тем, определение нормы титра IgG тоже вызывает затруднения, так как она целиком зависит от иммунного статуса конкретного человека, который, впрочем, устанавливается выявлением иммуноглобулинов класса G. Учитывая такое поведение антител, при диагностике ЦМВИ возникает необходимость в оценке способностей антител класса G взаимодействовать с ЦМВ, чтобы потом «обезвредить» его (авидность АТ). На начальном этапе болезни IgG очень плохо связываются с антигенами вируса (низкая авидность) и лишь потом начинают проявлять активность, стало быть, можно говорить о повышении авидности антител.

    Алгоритм ИФА-исследований при подозрении на ЦМВ

    Что такое паразиты – вряд ли стоит рассказывать, ведь они преследуют человека, начиная с детского возраста и, в полном смысле слова, отравляют ему жизнь (продукты жизнедеятельности паразитов очень ядовиты). Они бывают внушительных размеров (гельминты, а попросту – глисты) или маленькие (амебы, трихомонады, лямблии).

    До появления в клинической лабораторной диагностике иммуноферментного метода найти паразитов было весьма сложно, теперь же, как говорят: «Нет проблем!». А все потому, что есть ИФА, который отыщет паразита, в какой бы форме тот не пребывал (цисты, личинки, яйца или взрослая особь) и в какой бы части человеческого тела не находился. Для этого нужно лишь взять кровь из вены и найти антитела, которыми организм уже ответил на чужеродные антигены.

    О достоинствах иммуноферментного анализа можно говорить долго и много, ведь этот метод сумел решить многие диагностические задачи, используя лишь венозную кровь. Не нужно долгих ожиданий, волнений и проблем с забором материала для исследования. К тому же тест-системы для ИФА продолжают совершенствоваться и не за горами тот день, когда тест выдаст 100% достоверность результата.

    источник

    10



    Источник: domofoniya.com


    Добавить комментарий